0.4% Trypan Blue solution 臺盼藍(lán)染色液(0.4%)（NBS6274）

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0.4% Trypan Blue solution 臺盼藍(lán)染色液(0.4%)（NBS6274）

0.4% Trypan Blue solution 臺盼藍(lán)染色液(0.4%)
貨號：NBS6274-50ml；
NBS6274-100ml；
NBS6274-500ml
品牌：NoninBio

價格：￥150.00~1063.00

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規(guī)格：

50ml 100ml 500ml

產(chǎn)品詳細(xì)

臺盼藍(lán)染色液(0.4%)

0.4% Trypan Blue solution

產(chǎn)品編號	產(chǎn)品名稱	包裝規(guī)格
NBS6274-50ml	0.4% Trypan Blue solution 臺盼藍(lán)染色液(0.4%)	50ml
NBS6274-100ml	0.4% Trypan Blue solution 臺盼藍(lán)染色液(0.4%)	100ml
NBS6274-500ml	0.4% Trypan Blue solution 臺盼藍(lán)染色液(0.4%)	500ml

產(chǎn)品簡介：

臺盼藍(lán)（Trypan Blue，CAS NO. 72-57-1）是一種藍(lán)色酸性染料，含有兩個偶氮發(fā)色團(tuán)。是一種較大、親水和四磺酸化的陰離子染料，普遍用于檢測細(xì)胞膜的完整性以及評估細(xì)胞的存活率。作為一種鑒定細(xì)胞存活的簡易方法，臺盼藍(lán)滲透進(jìn)入喪失活性或細(xì)胞膜不完整的細(xì)胞將其染成藍(lán)色（通常認(rèn)為細(xì)胞膜完整性喪失，即可認(rèn)為細(xì)胞已經(jīng)死亡），而具有完整細(xì)胞膜的活細(xì)胞將染料排斥在外。因此，通過顏色的差異能肉眼直接區(qū)分死細(xì)胞和活細(xì)胞。

本品是0.4%臺盼藍(lán)染色液，使用方便，只需經(jīng)簡單的染色，即可通過光學(xué)顯微鏡直接計數(shù)來鑒定細(xì)胞的存活情況。

保存條件：

2-8℃保存，1年有效。

使用方法：

1）細(xì)胞收集

對于懸浮細(xì)胞：離心收集細(xì)胞，充分清洗后，用適當(dāng)緩沖液如PBS、HBSS重懸，制備成單細(xì)胞懸液。若有需要，可做適當(dāng)稀釋。

對于貼壁細(xì)胞：先用胰酶消化細(xì)胞，之后離心收集細(xì)胞，經(jīng)充分清洗后，再用適當(dāng)緩沖液重懸，制備成單細(xì)胞懸液。若有需要，可做適當(dāng)稀釋。

2）臺盼藍(lán)染色

將細(xì)胞懸液與0.4%臺盼藍(lán)染色液按照9：1的比例稀釋，輕輕混勻后，室溫染色3min。【注意】：一般情況染色3min足矣。某些情況可延長染色時間，但不宜超過10min。

3）細(xì)胞計數(shù)

吸取少量染色細(xì)胞到血球計數(shù)板內(nèi)，于普通光鏡10×物鏡下計數(shù)四個大格內(nèi)的細(xì)胞數(shù)，壓線者數(shù)上不數(shù)下，數(shù)左不數(shù)右，分別記錄著色細(xì)胞（包括損傷細(xì)胞和死細(xì)胞）和未著色細(xì)胞（活細(xì)胞）。

【注意】：用移液槍加樣，沿著蓋玻片的邊緣輕輕加液使其完全覆蓋住整個小室。不宜過量或量太少。

【注意】：1mm2方格內(nèi)細(xì)胞數(shù)目通常控制在20-50個。當(dāng)細(xì)胞數(shù)目超過200個，需重新調(diào)整稀釋倍數(shù)。

4）結(jié)果分析

按照以下公式來計算細(xì)胞數(shù)目和活細(xì)胞百分比，

i）計算每ml細(xì)胞數(shù)目：細(xì)胞數(shù) /ml= 1mm2大方格內(nèi)的平均細(xì)胞數(shù)×稀釋倍數(shù)×104；

【注意】：此處的稀釋倍數(shù)即為步驟2）內(nèi)的單細(xì)胞懸液與臺盼藍(lán)染色液混合后的稀釋倍數(shù)。

ii）總細(xì)胞數(shù)目：細(xì)胞總數(shù) = (細(xì)胞數(shù)/ml) × 最初制備單細(xì)胞懸液的總體積

iii）細(xì)胞存活率（活細(xì)胞率）：活細(xì)胞率（%）=（總細(xì)胞數(shù)目-總著色細(xì)胞數(shù)）/總細(xì)胞數(shù) × 100

【注意】：處于健康的對數(shù)生長期細(xì)胞，通常情況活細(xì)胞至少占到95%。

注意事項：

1）臺盼藍(lán)具有輕微的細(xì)胞毒性，操作過程中請注意防護(hù)，避免與身體的直接接觸。

2）凋亡小體偶爾也有臺盼藍(lán)拒染現(xiàn)象。