HS Universal qPCR Master Mix
產(chǎn)品編號(hào) | 產(chǎn)品名稱 | 包裝規(guī)格 |
NBS0014-5ml | HS Universal qPCR Master Mix | 5*1 mL |
產(chǎn)品簡介:
本產(chǎn)品是一款使用SYBR Green Ⅰ嵌合熒光法進(jìn)行 qPCR反應(yīng)的專用預(yù)混液。核心組分 Hot-start Taq 是基于抗體法修飾,搭配針對(duì) qPCR系統(tǒng)優(yōu)化的最適 Buffer,顯著提高了擴(kuò)增特異性和低拷貝基因的檢測(cè)靈敏度,能夠在寬廣的定量范圍內(nèi)得到優(yōu)異的擴(kuò)增線型,對(duì)靶基因進(jìn)行準(zhǔn)確定量、檢測(cè),重復(fù)性好,可信度高。本產(chǎn)品是一款 2 ×預(yù)混液,只需額外加入引物、模板即可,使用方便。
圖1所示,以Hela細(xì)胞為CDNA模板,使用HS UniversalaPCR Master Mix和其他品牌的產(chǎn)品,在同等條件下擴(kuò)增相同的基因。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示,NoninBio品牌的HS Universal gPCR Master Mix 擴(kuò)增效率更高,熒光強(qiáng)度更強(qiáng),可以獲得更高的擴(kuò)增平臺(tái)值。
圖2所示,以Hela細(xì)胞轉(zhuǎn)錄組cDNA為模板,使用HS UniversalqPCR Master Mix,ROX plus和其他品牌的產(chǎn)品,在同等條件下擴(kuò)增相同的基因,實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示,NoninBio品牌的HS Universal qPCRMaster Mix,ROX plus相對(duì)其他品牌,擴(kuò)增效率更高,熒光強(qiáng)度更強(qiáng),溶解曲線更集中尖銳。
實(shí)驗(yàn)流程:
配置如下 PCR 反應(yīng)體系:
成分 | 體積 |
2 × HS Universal qPCR Master Mix | 10 μL |
Primer F(10 μM) | 0.4 μL |
Primer R(10 μM) | 0.4 μL |
Template DNA | X μL |
ddH 2O | Up to 20 μL |
表 1. HS Universal qPCR Master Mix 反應(yīng)體系
建議 PCR 程序:
溫度 | 時(shí)間 | 循環(huán)數(shù) | |
預(yù)變性 | 95℃ | 30 sec~3 min | 1 Cycle |
循環(huán)反應(yīng) | 95℃ | 10 sec | 40 Cycles |
55-60℃ | 10~30 sec | ||
溶解曲線 | 95℃ | 15 sec | 1 Cycle |
60℃ | 60 sec | ||
95℃ | 15 sec |
表 2. HS Universal qPCR Master Mix 反應(yīng)程序
注:95℃ 30 sec 該預(yù)變性條件適合大多數(shù)擴(kuò)增反應(yīng),如模板結(jié)構(gòu)復(fù)雜,GC含量高,可將預(yù)變性時(shí)間延長至3 min,以提高預(yù)變性效果,同時(shí)酶活可以更高程度釋放,得到更好的實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
注意事項(xiàng):
1. 為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。