英文名稱：Tissue Digestive Mix-I

貨號(hào)：C3501-0020，C3501-0100,

規(guī)格：20ml/瓶、100ml/瓶

價(jià)格：詢價(jià)

【預(yù)期用途】

用于從組織上消化原代干細(xì)胞，做后續(xù)細(xì)胞體外增值培養(yǎng)。培養(yǎng)后的細(xì)胞僅用于體外分析檢測(cè)，不作為治療使用。

【檢驗(yàn)原理】

以特定酶自組織塊分離出原代間充質(zhì)干細(xì)胞是常見(jiàn)的細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)。組織消化液利用數(shù)種重組表達(dá)的消化酶制備而成，無(wú)動(dòng)物源成分。組織消化液針對(duì)組織的細(xì)胞外基質(zhì)而設(shè)計(jì), 不含胰酶，不會(huì)傷害細(xì)胞?？梢杂行У叵?xì)胞外基質(zhì)，進(jìn)而從組織塊 (臍帶、脂肪、胎盤(pán)) 分離出大量的原代間充質(zhì)干細(xì)胞，作為后續(xù)細(xì)胞增殖使用。

【主要組成成分】

由 DMEM -LG 基礎(chǔ)培養(yǎng)基、膠原脢、分散脢、脫氧核糖核酸酶組成。

【適用范圍】

收獲組織 (臍帶、脂肪、胎盤(pán))的原代間充質(zhì)干細(xì)胞, 做后續(xù)細(xì)胞體外增殖培養(yǎng)。

【儲(chǔ)存條件及有效期】

應(yīng)貯存在-10~-20℃，有效期為1年。開(kāi)封后存放4℃，注意避光，1周內(nèi)使用。不建議反復(fù)凍融。

【生產(chǎn)日期與失效日期】

詳見(jiàn)產(chǎn)品標(biāo)簽。

【使用方法】

以臍帶組織為例

1. 將臍帶用DPBS  漂洗干凈，剪成1-50px大小，剔除血管。

2. 將組織塊剪成3-5mm3，移入50ml離心管，再加入適量的分離液。

* 一條長(zhǎng)度10公分的臍帶建議加入10ml的分

離液；或者組織塊 : 分離液（vol）= 1:1。

** 視情況而定，可自行在分離液中添加1%青

鏈雙抗。

3. 把50ml離心管橫放在37度細(xì)胞培養(yǎng)箱，過(guò)夜反應(yīng)（16小時(shí)）。

* 若總反應(yīng)體積較大，也可持續(xù)旋轉(zhuǎn)混合。

4. 加入和分離液等體積的0.05%EDTA終止反應(yīng)后，1500 xg離心5分鐘，去除上清。

* 溶液比較濃稠，小心不要影響下層的細(xì)胞; 建

議留下5ml左右的溶液。

** 沒(méi)有EDTA, 可使用無(wú)鈣鎂DPBS取代。

5. 以和分離液等體積的無(wú)鈣鎂DPBS重懸細(xì)胞后，500 xg離心5分鐘，去除上清。

6. 再次以和分離液等體積的無(wú)鈣鎂DPBS重懸細(xì)胞后，250 xg離心5分鐘，去除上清。

7. 用適量的培養(yǎng)基重懸細(xì)胞后，即可按常規(guī)細(xì)胞培養(yǎng)方法接種P0代細(xì)胞培養(yǎng)。

* 消化后的原代細(xì)胞，建議培養(yǎng)時(shí)接種密度提高

到10,000/cm2以上；傳代后即可按常規(guī)的接

種密度培養(yǎng) 。

以皮下脂肪組織塊為例

1. 以DPBS將新鮮的皮下脂肪組織塊漂洗干凈，剔除明顯的血管或血塊。

2. 將組織塊剪成3-5mm3，移入50ml離心管，再加入適量的分離液。

* 1克組織塊可加入約5ml分離液。

** 視情況而定，可自行在分離液中添加1%青鏈雙抗。

3. 把50ml離心管橫放在37度細(xì)胞培養(yǎng)箱，反應(yīng)4小時(shí) (用戶也可自行調(diào)整反應(yīng)時(shí)間)。

 * 若總反應(yīng)體積較大，也可使用持續(xù)旋轉(zhuǎn)混合。

4. 加入和分離液等體積的0.05%EDTA

終止反應(yīng)后，250 xg離心5分鐘，去除上清。

* 沒(méi)有EDTA, 也可使用無(wú)鈣鎂DPBS取代。

5. 以和分離液等體積的無(wú)鈣鎂DPBS重懸細(xì)胞后，

250 xg離心5分鐘，去除上清。

6. 再次以和分離液等體積的無(wú)鈣鎂DPBS重懸細(xì)

胞后，250 xg離心5分鐘，去除上清。

7. 用適量的培養(yǎng)基重懸細(xì)胞，再以100目的篩網(wǎng)

過(guò)濾細(xì)胞液后，即可按常規(guī)細(xì)胞培養(yǎng)方法接種

細(xì)胞培養(yǎng)。

* 消化后的原代細(xì)胞，建議培養(yǎng)時(shí)接種密度提高

到10,000/cm2以上；傳代后即可按常規(guī)的接

種密度培養(yǎng)。

【產(chǎn)品性能指標(biāo)】

1.       pH值：7.0-8.0

2.       滲透壓（MOSM/KG）：310-345

3.       無(wú)菌檢測(cè)：無(wú)菌

4.       內(nèi)毒素（EU/ml）：＜10

5.       原代細(xì)胞分離實(shí)驗(yàn)：＞80%

【注意事項(xiàng)】

1.       本品僅用于體外診斷，不用于臨床治療，嚴(yán)禁內(nèi)服，不能用嘴吸液。

2.    試劑包裝如有破損或滴漏，嚴(yán)禁使用。

3.    操作過(guò)程應(yīng)避免污染。

4.    操作人員萬(wàn)一與皮膚、粘膜接觸，請(qǐng)立即用自來(lái)水沖洗。

5.    禁止使用超出規(guī)定有效期的產(chǎn)品。

【備案人/生產(chǎn)企業(yè)】

上海達(dá)特希爾生物科技有限公司

生產(chǎn)地址/住所：中國(guó)（上海）自由貿(mào)易試驗(yàn)區(qū)祖沖之路 1505弄80號(hào)12幢3樓C，D區(qū)

郵政編碼：201203 

電話號(hào)碼：021-58785545

傳真號(hào)碼：021-58777053

【售后服務(wù)單位】

上海達(dá)特希爾生物科技有限公司

【產(chǎn)品技術(shù)要求編號(hào)】

滬浦械備20200167號(hào)

【醫(yī)療器械備案憑證編號(hào)】

滬浦械備20200167號(hào)

【生產(chǎn)備案憑證編號(hào)】

滬浦食藥監(jiān)械生產(chǎn)備20152128號(hào)

【說(shuō)明書(shū)批準(zhǔn)及修改日期】

2021年09月17日