TTC 紅四氮唑（2,3,5-氯化三苯基四氮唑）

產(chǎn)品簡(jiǎn)介：

2,3,5-氯化三苯基四氮唑，又稱四唑紅，簡(jiǎn)稱TTC，TTZ，或TPTZ，一種脂溶性光敏感復(fù)合物，既可用來(lái)檢測(cè)種子的生存能力，也可用來(lái)檢測(cè)哺乳動(dòng)物組織的缺血梗塞。檢測(cè)機(jī)制在于TTC本身可作為一種氧化還原指示劑，活細(xì)胞內(nèi)的脫氫酶（尤其是線粒體內(nèi)的琥珀酸脫氫酶）可以將TTC還原為紅色甲臢化合物TPF（1,3,5-triphenylformazan）。對(duì)于種子或者植物組織來(lái)說(shuō)，染色結(jié)果為活組織被染成不同程度的紅色，死組織或者無(wú)生命力的組織不著色。對(duì)于缺血梗塞組織，因組織壞死脫氫酶活力喪失呈現(xiàn)蒼白色，而正常組織呈深紅色。TTC常用的染色濃度為2%（w/v），也可根據(jù)組織類型做濃度的適當(dāng)調(diào)整。

產(chǎn)品特性：

1）CAS NO：298-96-4

2）同義名：2,3,5,Triphenyl-2H-Tetrazolium Chloride 2,3,5-三苯基-2H-四唑鹽酸鹽；2,3,5-Triphenyltetrazolium Chloride 2,3,5-氯化三苯基四氮唑；Tetrazolium red紅四氮唑，紅四唑，四氮唑紅；TPTZ；TTZ；

3）分子式：C19H15ClN4

4）分子量：334.8g/mol

5）外觀：類白色至淺黃色結(jié)晶

6）純度：>98%

7）溶解性：溶于水（10mg/ml），乙醇（10mg/ml）和丙酮，不溶于乙醚

8）化學(xué)結(jié)構(gòu)圖：

保存條件: 

2-8℃避光干燥保存，3年有效。

產(chǎn)品應(yīng)用：

1）用于植物根系活力測(cè)定；

定性檢測(cè)方法：1% TTC溶液：0.4M琥珀酸：磷酸緩沖液=1:5:4混合，浸沒(méi)根部，37℃暗處孵育1-3h，觀察著色情況。結(jié)果：新根尖端或細(xì)側(cè)根明顯變?yōu)榧t色，表明這些部位有脫氫酶存在，有細(xì)胞代謝活力。

2）用作種子活力測(cè)定；

定性檢測(cè)方法：0.5%TTC溶液，浸沒(méi)剝?nèi)シN皮（勿傷害種胚）的種子，恒溫箱（30-35℃）暗處孵育0.5-1h左右。染色結(jié)束，倒去TTC溶液，用清水清洗種子1-2次，觀察種胚染色情況。結(jié)果：凡種胚全部或大部分被染紅色即為有活力種子，不被染色的為死種子。

3）用作花粉活力測(cè)定；

定性檢測(cè)方法：0.5%TTC溶液；將花粉取少許置于干凈載玻片上，加1-2滴0.5%TTC溶液，攪勻后蓋上蓋玻片，以清水為對(duì)照，37℃恒溫箱暗處孵育0.5h左右，鏡檢。結(jié)果：花粉死亡不能被染色；花粉生命力衰退或部分喪失則染色較淺或局部被染色；根據(jù)花粉染色的深淺程度來(lái)鑒定花粉的生命力。

4）用作微生物生長(zhǎng)測(cè)定；

定性檢測(cè)方法：1%無(wú)菌TTC溶液；預(yù)熱到50℃左右，按照取1ml 1%TTC溶液到100ml冷卻到50-60℃的固體/液體培養(yǎng)基比例來(lái)使用。可用于大腸型細(xì)菌的計(jì)數(shù)和鑒定。

產(chǎn)品使用：(僅供參考)

1.1染色工作液的配制
TTC通常用磷酸緩沖鹽溶液來(lái)配制，pH范圍為6.5-7.5之間，常用的工作濃度為2%，也可用1%或者更低的濃度，根據(jù)自身實(shí)驗(yàn)體系調(diào)整。

可使用以下的緩沖鹽體系配制：

1）取9.078 g KH₂PO₄（MW：136.09）溶于1L去離子水內(nèi)，制備成66.7 mM KH₂PO₄儲(chǔ)存液；取9.472 g Na₂HPO₄·H₂O（Mw：137.99）溶于1 L去離子水內(nèi)，制備成68.6 mM Na₂HPO₄儲(chǔ)存液；將兩份KH₂PO₄儲(chǔ)存液與1份Na₂HPO₄儲(chǔ)存液充分混合，即得到需要的磷酸緩沖液溶液。

2）根據(jù)需要的TTC工作液濃度來(lái)制備，如加入2 g TTC粉末到100 mL混合的磷酸鹽緩沖液中，即得到2%的染色工作液。此時(shí)的溶液pH值在6.5-7.5之間。此工作液可裝到不透明的白色瓶或者棕色瓶子內(nèi)，4°C保存幾個(gè)月穩(wěn)定。

【注意：TTC染色液的緩沖體系可根據(jù)自己的實(shí)驗(yàn)習(xí)慣來(lái)調(diào)整；也可用去離子水來(lái)溶解配置成10 mg/mL的儲(chǔ)存液，過(guò)濾除菌，建議此法染色液當(dāng)天使用?！?span>
1.2染色方法（動(dòng)物組織）
1）取新鮮組織切片放到裝有TTC染色液的染色容器內(nèi)，37℃避光孵育15-30 min，邊孵育邊觀察顏色變化；【注意：TTC染色液可重復(fù)使用2-3次，可將用過(guò)的TTC染色液放到新的容器內(nèi)繼續(xù)使用?！?/span>

2）【可選】輕柔的吸取緩沖液（如1×PBS）將組織表面多余的染色液沖洗掉；

3）此時(shí)即可觀察或者拍照。若需長(zhǎng)久保存，用4%多聚甲醛溶液（貨號(hào)：NBS0135）固定10-20 min。

注意事項(xiàng)：

1.      本品具有微量的光和熱敏感性，使用以及存放的過(guò)程中避免長(zhǎng)時(shí)間曝光或者接觸到過(guò)高溫度下。

2.      為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。

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