LDS 751 Nucleic Acid Stain核酸染色劑

產(chǎn)品簡(jiǎn)介：

LDS 751是一種細(xì)胞膜通透性的核酸染色劑，用于從無(wú)核和受損的有核細(xì)胞中區(qū)分完整的有核細(xì)胞，以及在混合的中性粒細(xì)胞、淋巴細(xì)胞和單核細(xì)胞中用流式細(xì)胞術(shù)區(qū)分不同的細(xì)胞類型。LDS 751與dsDNA結(jié)合的最大激發(fā)波長(zhǎng)~543nm，能用488nm氬離子激光器來(lái)激發(fā)，由于具有較長(zhǎng)的最大發(fā)射波長(zhǎng) (～712 nm) 而特別適用于多色分析。與dsDNA的結(jié)合引起~20倍的熒光增強(qiáng)。噻唑橙（主要結(jié)合RNA，貨號(hào)：NBS7693）和LDS 751（主要結(jié)合DNA）用來(lái)區(qū)分紅細(xì)胞、血小板、網(wǎng)織紅血球和有核細(xì)胞。

產(chǎn)品特性：

1） CAS NO.：181885-68-7

2） 化學(xué)名：Quinolinium, 6-(dimethylamino)-2-[4-[4-(dimethylamino)phenyl]-1,3-butadienyl]-1-ethyl, perchlorate

3） 同義名：Laser dye styryl-751; LDS-751;

4） 分子式：C₂₅H₃₀ClN₃O₄

5） 分子量：471.98

6） 外觀：固體

7） 溶解性：溶于DMSO

8） Ex/Em：~543?712nm（與DNA結(jié)合）

9）化學(xué)結(jié)構(gòu)圖：

保存條件: 

-20°C避光干燥保存，至少1年有效。 

產(chǎn)品使用：

【注意】：以下步驟適用于大多數(shù)細(xì)胞類型。生長(zhǎng)培養(yǎng)基、細(xì)胞密度、是否存在其它細(xì)胞類型都可能影響染色。玻璃表面殘留的去污劑也可能影響許多有機(jī)體的染色結(jié)果，在含或不含細(xì)胞的溶液內(nèi)都可能看到明亮的染色材料。

1）制備5-10mM的DMSO儲(chǔ)存液，比如：往25mg LDS 751粉末（MW：471.98）內(nèi)加入5.297ml DMSO充分溶解，即得到10mM的儲(chǔ)存液，根據(jù)單次用量分裝，置于-20℃避光保存，避免反復(fù)凍融。

2）加1-10μM染色工作液到細(xì)胞內(nèi)（或懸浮細(xì)胞，或貼壁細(xì)胞），染色15-60min。第一次實(shí)驗(yàn)務(wù)必嘗試幾種染色濃度，以確定最佳的工作濃度。高染料濃度很可能引起其它細(xì)胞結(jié)構(gòu)的非特異染色。

3）直接用合適的儀器比如流式細(xì)胞儀，熒光酶標(biāo)板等來(lái)觀察染色結(jié)果。

染色示例（來(lái)自文獻(xiàn)，僅作參考）

實(shí)驗(yàn)?zāi)康模?/span>研究中性粒細(xì)胞對(duì)細(xì)菌的吞噬比例； 

實(shí)驗(yàn)方法：吞噬前和吞噬后的樣本分別用FACSVerse流式細(xì)胞儀收集數(shù)據(jù)。為了同時(shí)獲取細(xì)菌（~1 μm直徑）和中性粒細(xì)胞（~12 μm），對(duì)數(shù)模式設(shè)置FSC和SSC參數(shù)。為了消除FSC和SSC的滿程對(duì)數(shù)擴(kuò)增引起的大量背景事件，吞噬后的中性粒細(xì)胞用LDS-751核酸染色劑（0.3 μg/ml） 于4℃孵育5min，不用沖洗。GFP（S. aureus）和LDS-751（PerCP 通道設(shè)置）（中性粒細(xì)胞）信號(hào)以對(duì)數(shù)形式收集，兩者用作閾值信號(hào)。獲取事件總數(shù)為50,000。

注意事項(xiàng)：

1.      熒光染料均存在淬滅問(wèn)題，請(qǐng)盡量注意避光，以減緩熒光淬滅。

2.      為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。

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